二氧化碳培養箱是細胞培養的關鍵設備,廣泛應用于生物醫學研究、制藥、臨床診斷等領域。以下是其典型使用案例及操作要點:
一、常見應用場景
1. 細胞培養
案例:培養HeLa細胞用于癌癥研究。
參數設置:37℃、5% CO?(模擬體內環境),濕度>90%防止培養基蒸發。
關鍵點:需定期校準CO?濃度傳感器,避免pH波動影響細胞生長。
2. 干細胞研究
案例:誘導多能干細胞(iPSCs)分化為心肌細胞。
特殊需求:需嚴格無菌(內置UV滅菌或HEPA過濾器),O?濃度控制(部分實驗需低氧條件)。
3. 病毒培養與疫苗開發
案例:培養Vero細胞生產狂犬病疫苗。
注意事項:需生物安全級培養箱(如二級生物安全柜配套使用),避免氣溶膠污染。
4. 組織工程
案例:3D打印的軟骨組織在培養箱中成熟化。
調整參數:CO?可調至7 10%以促進膠原合成。
二、操作注意事項
1. 滅菌與清潔
使用前用70%乙醇擦拭內壁,定期高溫滅菌(如180℃干熱)。
水盤需用無菌水,避免微生物污染。
2. 氣體控制
CO?鋼瓶需配備減壓閥,建議使用純度≥99.9%的氣體。
開機后需穩定4 6小時再放入細胞(確保溫濕度、CO?平衡)。
3. 監測與校準
每日記錄溫度、CO?濃度(如紅外傳感器數據)。
每季度校準一次傳感器(使用標準氣體)。
4. 故障應對
CO?波動大:檢查氣瓶壓力、管路漏氣或傳感器故障。
濕度不足:檢查水盤水位或加濕系統。
三、特殊案例:原代細胞培養
挑戰:原代細胞(如肝細胞)對環境敏感。
優化方案:
使用預平衡的培養箱(提前24小時設定參數)。
添加抗生素(如青霉素 鏈霉素)防止污染。
通過合理設置參數和規范操作,二氧化碳培養箱可顯著提高細胞實驗的重復性和可靠性。實際應用中需結合實驗目的選擇功能(如搖床整合、實時監控等)。
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